2013년 10월 1일 화요일

분자생물학실험 타우린의 항비만 효과를 알아보는 실험

분자생물학실험 타우린의 항비만 효과를 알아보는 실험
[분자생물학실험] 타우린의 항비만 효과를 알아보는 실험.hwp


목차
목 차
1. 서론

2. Material

3. 실험 방법

<고정 과정>

<염색 과정>

4. 실험결과

5. 고찰

6. 참고 문헌 및 출처



본문

<고정 과정>
1) 영양상태의 부족함이 없는 배지에서 자란 worm을 1ml 의 S media로 워싱해서 모은다.
- worm은 wild type 과 RB(tub1)가 있고 각각에 대하여 타우린을 0,1,10(㎍/㎖)처리한 것들을 취하므로 총 6개의 샘플이 만들어질 것이다.

2) 모은 worm을 S media로 2~3회 정도 워싱 한다. 각 회 마다 600g 로 cetrifuge 해주면서 상층액이 투명해질 때까지 해준다.
- worm 과 섞여있는 bacteria를 제거해주는 과정이고, cetrifuge 후에 상층액에 뿌옇게 떠 있는 것이 bacteria를 비롯한 불순물이기 때문에 투명해질 때까지 해준다.

3) S media 에 30분 정도 담가둔다
- worm의 창자에 남아 있을 수 있는 bacteria를 제거 해주기 위함이다.

4) cetrifuge한 후, S media로 한번 더 워싱해준다.

5) 1%의 paraformaldehyde stock을 넣고 잘 섞어준 후, 액체 질소에서 얼렸다가 녹인다. (1분 간격으로 3회 정도 반복해준다.)

6) 10분간 얼음에 놓아둔다.



본문내용
서 비만에 대한 타우린의 효능과 tub1의 돌연변이가 비만과 어떠한 관련이 있는지 보고자 한다. 콜레스테롤, 중성지방, 인지질 등 세포 내의 지질과 반응하는 sudan black B를 사용하여 눈으로 볼 수 있는 결과물로써 결론을 도출한다.
2. Material
① wild type, RB(tub1)의 C.elegans (타우린 0,1,10(㎍/㎖)처리)
② 4% paraformaldehyde stock (1 %로 희석해서 사용한다)
③ sudan black B solution
: 70% ethanol에 sudan black B를 포화될 정도의 양을 넣고, 녹지 않은 것들이 가라앉길 기다린 후에, 상층액을 취해서 filtering 한다.
④ 25%, 50%, 70% ethanol 수용액
⑤ S mediu

참고문헌

6. 참고 문헌 및 출처

- 켄자스 주립대학교 홈페이지 (http://www.k-state.edu)
- 연세대학교 원주 기독 병원 진단 검사 의학과
홈페이지 (http://cpl.yonsei.ac.kr/)
 

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